产品货号:
KL00956
中文名称:
柱式PAGE胶蛋白回收试剂盒
英文名称:
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒用于从PAGE凝胶中回收蛋白质以用于制备抗体、用于免疫印迹实验、用于氨基酸组分分析或末端序列测定等。
保存:室温,有效期1年。
相关搜索:柱式PAGE胶蛋白回收试剂盒,PAGE胶蛋白纯化试剂盒
- 简单,不需要购买复杂而昂贵的仪器设备(如电洗脱仪)。
- 适用于变性胶(SDS-PAGE)、非变性胶(如Blue PAGE)和其他任何PAGE胶。
- 蛋白的回收率一般在50~90%之间(跟蛋白质大小,洗脱时间相关)。
- 回收的蛋白可用于后续多种实验,包括2D电泳、质谱测序、抗体制备。
组分 | 规格 |
PAGE胶蛋白回收溶液A | 10mL |
离心吸附柱 | 50个 |
保存:室温,有效期1年。
- 按常规方法进行变性SDS-PAGE、尿素-PAGE,Tricine-SDS-PAGE电泳,或非变性蛋白电泳,如Bule PAGE。由于PAGE胶固定和染色后,蛋白回收效果很差,所以建议把蛋白样品同时上样到多个孔中并电泳。
- 电泳结束后,在对PAGE胶进行固定和染色时,切下其中一个样孔所对应的胶条进行固定和染色,其余的不固定不染色。
- 将出现蛋白条带后的胶条放回到在整个PAGE胶中此胶条切除前的位置,通过胶条上的蛋白条带来找到在未染色胶上该蛋白预计出现的区域,并切下此区域的PAGE胶(含未固定和为染色的目的蛋白)进行回收。
- 去除含目的蛋白的胶条的多余凝胶,否则它们会影响蛋白回收效率。
- 将修整后的PAGE胶条转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中,放-80℃过夜。
- 同时将一个非常干净的研钵和研磨杵放-20℃过夜。
- 次日,将凝胶倒入用研钵中,用研磨杵研磨成粉。
- 将凝胶粉转移到一个吸附柱中。
- 加入100μL PAGE胶蛋白回收试剂溶液A,放置10分钟。期间,凝胶将膨胀,继续补加,直到凝胶不再膨胀并且凝胶上层覆盖1~2mm厚的液体。
- 室温12000g离心3分钟,收集穿透液,并转移到新的离心管中,标注为穿透液1。
- 再加入PAGE胶蛋白回收试剂溶液A,使得凝胶上层覆盖1~2mm厚的液体。
- 室温12000g离心3分钟,收集穿透液,并转移到新的离心管中,标注为穿透液2。
- 测定穿透液中的蛋白浓度或长度,可以直接进行后续实验,也可以放-20℃长期保存。
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